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零背景ZT4-Blunt快速克隆試劑盒(含多克隆位點(diǎn))新品上市

發(fā)布者:莊盟生物發(fā)布時間:2015-07-20瀏覽次數(shù):4582次

■ 產(chǎn)品簡介

零背景ZT4-Blunt克隆試劑盒是專門對平滑末端DNA片段或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行高效克隆的一種陽性篩選系統(tǒng)。該克隆載體包含一個致死基因,當(dāng)目的DNA片段插入克隆位點(diǎn)時,該致死基因被破壞,故僅帶插入目的片段的克隆才能生長形成白色菌落,無需加入IPTG及X-Gal進(jìn)行藍(lán)白斑篩選;克隆陽性率超過95%。


產(chǎn)品亮點(diǎn)

·可5min快速連接,且克隆效率超過95%

·無需IPTG及X-Gal進(jìn)行藍(lán)白斑篩選

·PCR擴(kuò)增產(chǎn)物無需磷酸化

·酶切產(chǎn)物無需去磷酸化

·專用于平滑末端DNA片段或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物

·特別適合Pfu、KOD等系列產(chǎn)物的克隆


1.制備片段

       
★平端片段(Pfu、KOD等擴(kuò)增產(chǎn)物)
★片段濃度最低可至5ng/μL

2.與載體混合加入連接酶

       




★實(shí)現(xiàn)5min快連
★最長可連接10kb片段(即使5kb片段,也已超過95%的陽性率)
★載體穩(wěn)定性極高,反復(fù)凍融影響極低


3.轉(zhuǎn)化

     

★采用先進(jìn)的自殺基因篩選技術(shù)無需繁瑣藍(lán)白斑篩選,陽性克隆率接近100%


菌落PCR



儲存

-20℃下至少保存1年。


ZT4-Blunt載體測序引物序列

Forward Sequencing Primer,20-mer:5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’

Reverse Sequencing Primer,24-mer:5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’


ZT4-Blunt載體圖譜




ZT4-Blunt載體多克隆位點(diǎn)序列