產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒為檢測(cè)基因的表達(dá)量提供有效的手段,在DLR 檢測(cè)中,螢火蟲(chóng)螢光素酶(Firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Renilla luciferase)的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。先以螢光素(Luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)螢光素酶的活性,然后加入抑制螢火蟲(chóng)螢光素酶催化的物質(zhì),同時(shí)加入腔腸素(Coelenterazine)檢測(cè)海腎螢光素酶的活性,實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)。通過(guò)螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系,可以非常靈敏、高效地檢測(cè)基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或 5' 啟動(dòng)子區(qū)克隆在Luciferase 的上游,或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游,構(gòu)建成報(bào)告基因(Reporter gene)質(zhì)粒,然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞,通過(guò)檢測(cè)螢光素酶活性的高低來(lái)判斷藥物處理等對(duì)目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。海腎螢光素酶更多地被用作檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參,以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。
螢火蟲(chóng)螢光素酶催化luciferin發(fā)光的最強(qiáng)發(fā)光波長(zhǎng)為560nm。海腎螢光素酶催化coelenterazine發(fā)光的最強(qiáng)發(fā)光波長(zhǎng)為465nm。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):
本試劑盒的光信號(hào)可以通過(guò)化學(xué)發(fā)光儀、酶標(biāo)儀或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。該試劑盒具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣,無(wú)細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。