產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
SD+缺陷型氨基酸混合物是由Minimal SD Base與缺陷氨基酸混合物混合而成,如SD/-His Broth即Minimal SD Base混合了DO Supplement-His。用做篩選培養(yǎng)基,用于選擇培養(yǎng)含有特異載體的酵母或進(jìn)行雜交篩選。又如,SD/-Leu Broth,SD/-Trp Broth分別用于篩選bait和prey載體(bait和prey載體帶有合成色氨酸和亮氨酸的基因)。攜帶這兩個(gè)載體的酵母細(xì)胞可以在雙缺篩選培養(yǎng)基SD/-Leu/-Trp生長(zhǎng),而不含有這兩個(gè)基因的親代酵母菌株(如Y2H Gold)不能生長(zhǎng)。
使用方法:(新配方不用調(diào)節(jié)PH值)
(1). 在500ml去離子水中加入1袋(0.5L規(guī)格)SD +缺陷型氨基酸混合物,攪拌溶解。
(2). 115℃高壓滅菌15分鐘。
(3). 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。
注意事項(xiàng):
1.GAL1啟動(dòng)子誘導(dǎo)表達(dá)要選用Minimal SD Agar Base Gal/Raf培養(yǎng)基。
2.在配制酵母缺陷培養(yǎng)基時(shí),培養(yǎng)基會(huì)變色,由淺黃到深褐色不等,對(duì)酵母的生長(zhǎng)不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重影響。
3.Minima SD Agar Base Gal/Raf培養(yǎng)基高溫高壓下可能對(duì)誘導(dǎo)效果產(chǎn)生抑止,尤其是在做表達(dá)調(diào)節(jié)介導(dǎo)的功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)需特別注意!
● 如果需要制備固體平板,可購(gòu)買相關(guān)SD +缺陷型氨基酸混合物 with Agar試劑;
或者配置時(shí)自行添加Agar,務(wù)必選用優(yōu)質(zhì)Agar,添加量為20 g/L。冷卻到50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
● 為什么我做的平板不凝?
自行添加Agar,務(wù)必選用優(yōu)質(zhì)Agar,添加量為20 g/L。固體培養(yǎng)基不凝固可能是由于pH值偏低或者滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(也會(huì)降低pH值);水質(zhì)偏酸也會(huì)使得培養(yǎng)基偏酸,建議滅菌前調(diào)整SD系列培養(yǎng)基的pH至5.8。121℃,高壓滅菌15min,及時(shí)從滅菌鍋內(nèi)取出培養(yǎng)基。