本公司生產(chǎn)的BL21-Gold(DE3)感受態(tài)細(xì)胞是采用特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率高達(dá)107cfu/μg DNA以上。
基因型為:E. coli B F- ompT hsdS(rB- mB-)dcm+ Tetr gal λ (DE3) endA Hte
BL21-Gold(DE3)是BL21系列細(xì)胞的升級版,提升了轉(zhuǎn)化效率并且能夠產(chǎn)生高質(zhì)量的小提DNA。
BL21-Gold(DE3)是利用T7 RNA聚合酶啟動進(jìn)行蛋白表達(dá)的載體的高效表達(dá)菌株。本宿主菌來源于E.coli B,缺乏Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,能夠有效防止目標(biāo)蛋白降解。
BL21-Gold(DE3)感受態(tài)細(xì)胞具有Hte表型,該表型增加了細(xì)胞的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率。另外,菌株內(nèi)的endonuclease I (endA)編碼基因被失活了,而該蛋白酶(endA)能夠在大部分的質(zhì)粒小提時(shí),快速降解質(zhì)粒DNA。這兩個(gè)菌株明顯特征,使得該菌株能夠直接用來擴(kuò)增克隆蛋白表達(dá)構(gòu)建質(zhì)粒。
由于在未使用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)時(shí),宿主菌內(nèi)仍然有少量T7 聚合酶合成,這能夠?qū)е律倭康哪康牡鞍缀铣?。如果目的蛋白是毒性蛋白的話,會抑制?xì)菌生長,甚至導(dǎo)致細(xì)菌死亡。所以本菌株不適合表達(dá)對細(xì)菌有毒性或生長抑制的蛋白。