許多高溫DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等擴增的PCR產(chǎn)物在3’-末端后都帶有一個突出的堿基"A",這樣的PCR產(chǎn)物可以用3’-末端后帶有一個突出堿基"T"的載體方便地進行克隆。pBLUE-T 載體來源于pBlueScript II SK(+) 質(zhì)粒,在EcoRI酶切位點處添加了適當序列,經(jīng)Xcm I 酶切后其3’末端直接產(chǎn)生未配對的"T"堿基而成,因此有更高的重組效率。pBLUE-T 載體插入位點兩端獨特設(shè)計的兩個EcoR I位點使插入片段可以用廉價高效的EcoR I單酶切檢測; 同時pBLUE-T 載體不含NdeI或NcoI限制性內(nèi)切酶位點,可方便用于克隆含上述酶切位點的基因。此外,本公司載體連接體系還有背景低(藍斑小于10%),重組率高(白斑中超過90%有插入片段),可快速連接等特點。本說明書末列出了pBLUE-T 載體相關(guān)的技術(shù)資料,其全序列可參照pBlueScript II SK(+)序列,只是其多克隆酶切位點處序列稍有不同。
■ 產(chǎn)品亮點
★實現(xiàn)5-10min快連,無需過夜
★需要藍白斑篩選
★藍斑率低于10%
★重組率高,克隆效率高達90%
★可5ul體系連接,連接效率不變
★適合Taq、Tth等系列產(chǎn)物的克隆
★可使用M13、T7、T3啟動子引物測序
★多克隆位點豐富便于重組表達基因的亞克隆
■ 儲存
保存:-20℃至少保存1年。
■ pBLUE-T載體測序引物序列
M13F: TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R: CAGGAAACAGCTATGACC
■ pBLUE-T載體圖譜


■ pBLUE-T載體多克隆位點序列
