產(chǎn)品簡介:

用 LiAc 轉化法進行酵母轉化時，會通過使用 carrier DNA，選用對數(shù)期的酵母菌，優(yōu)化質粒 DNA 的質量和濃度等方法來提高轉化效率。YPD Plus 用于轉化后復蘇酵母菌，可以有效提高轉化效率 50-100%。

使用方法:（轉化步驟具體可參考購買感受態(tài)使用說明或者感受態(tài)制備試劑盒，轉化步驟反應體積可能略有差異）

一、1.5 mL 體系：

1、在含有約 1 μg 質粒的 1.5 mL 無菌離心管中，加入 5 μL 預變性的 Carrier DNA，50 μL 酵母感受態(tài)細胞，350 μL LiAc/PEG3350 混合液輕柔混勻。

2、30℃水浴或者金屬浴 30 min，每 10 min 混勻一次。

3、每管加入 20 μL DMSO，輕柔混勻。

4、42℃水浴熱激 15 min，每 5 min 上下顛倒混勻一次。

5、1000 g 離心 5 min。

6、棄掉上清，用 1 mL YPD PlusLiquid Medium 重新懸浮，30℃搖床震蕩培養(yǎng) 30-60 min。

7、1000 g 離心 5 min。加入 1 mL 無菌 0.9%NaCl 重懸菌體。

8、分別稀釋 10 倍，100 倍后涂布于相應的缺陷型培養(yǎng)基上。

9、30℃恒溫培養(yǎng) 3-5 天。

二、15 mL 體系：

1、在含有約 5-15 μg 質粒的 15 mL 無菌離心管中，加入 20 μL 預變性的 Carrier DNA，600 μL 酵母感受態(tài)細胞，2.5 mL LiAc/PEG3350 混合液輕柔混勻。

2、30℃水浴 45 min，每 10 min 混勻一次。

3、每管加入 160 μL DMSO，輕柔混勻。

4、42℃水浴熱激 20 min，每 5 min 上下顛倒混勻一次。

5、1000 g 離心 5 min。

6、棄掉上清，用 3 mL YPD Plus Liquid Medium 重新懸浮，30℃搖床震蕩培養(yǎng) 90 min。

7、1000 g 離心 5 min。根據(jù)實驗需求加入相應體積的無菌 0.9%NaCl 重懸菌體。

8、涂布于相應的缺陷型培養(yǎng)基上。

9、30℃恒溫培養(yǎng) 3-5 天。

儲存條件:

-20℃儲存，有效期 12 個月。