■ 產(chǎn)品介紹
Origami B(DE3)屬于大腸桿菌表達(dá)型菌種,可使用LB培養(yǎng)基在37℃有氧的條件下進(jìn)行培養(yǎng),OrigamiB(DE3)的感受態(tài)細(xì)胞可以在42℃下熱激處理轉(zhuǎn)化質(zhì)粒。使用IPTG可以誘導(dǎo)目的基因高效表達(dá)。 Origami B系列菌株同樣具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突變,但是該菌株是來(lái)源于BL21的lacZY基因突變株。所以O(shè)rigamiB系列菌株是集合BL21,Tuner和Origami三種菌株的優(yōu)點(diǎn)于一身。在thioredoxinreductase(trxB)和glutathionereductase(gor)基因上同時(shí)含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。TrxB和Gor基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性,所以本菌株無(wú)法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。DE3是溶源性的λDE3,所以在lacUV5啟動(dòng)子下攜帶有T7RNA聚合酶的染色體拷貝,因此該菌株適用于pET系列載體,及其他T7啟動(dòng)子系列載體。 |
基因型: | F- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR) |
■ 基本信息
抗性: | 卡那(Kan) / 四環(huán)素(Tet) |
培養(yǎng)基: | LB |
菌株類(lèi)別: | 大腸桿菌 |
培養(yǎng)條件: | 37℃,有氧,LB |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 42℃熱激 |
保存方式: | 20%甘油,-80℃ |
基本應(yīng)用: | 用于蛋白表達(dá) |
■ 使用方法
建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板,得到單克隆后再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作,避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究,不能用于動(dòng)物,人體以及作為食品添加劑等用途。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌時(shí)可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可,也可完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,菌株的活力會(huì)逐漸下降。