■ 產(chǎn)品介紹
PichiaPink Strain1是畢赤酵母Pink菌株,屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的,因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染,往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素,來抑制細菌菌的污染和生長。 PichiaPink Strain1酵母適宜的生長溫度是24-30度,溫度超過32度對于細胞內(nèi)的蛋白表達是毀滅性災(zāi)難,可能導致細胞的死亡。 ADE2基因編碼磷酸核糖甲酰胺咪唑羧化酶基因,該基因能夠催化嘌呤核苷酸合成的第六步反應(yīng)。在釀酒酵母,畢赤酵母,或者其他酵母中,這個基因的突變或缺失能夠?qū)е锣堰是绑w在酵母細胞內(nèi)液泡內(nèi)的積累,使得細胞呈現(xiàn)粉紅色。 Pink1酵母菌株是ade2營養(yǎng)缺陷型,細胞內(nèi)的ade2基因被缺失,部分ade2啟動子也被缺失,所以菌株在缺乏腺嘌呤(adenine)的培養(yǎng)基中無法生長,而且在富培養(yǎng)基中生長緩慢。將含有ade2基因的表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入該菌株中后,能夠使得菌株獲得在腺嘌呤缺乏的培養(yǎng)基中生長,而且菌株顏色由ade2基因缺失時的粉紅色恢復為白色。從而間接的指明那些克隆菌株轉(zhuǎn)化質(zhì)粒成功。 配套載體是pPinkα-HC, pPink-HC 或者pPink-LC。 |
菌株類型: | 畢赤酵母,彩虹酵母 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD培養(yǎng)基 |
生長條件: | 24-30 ℃, 有氧 |
基因型: | ade2 |
表型: | Ade2- |
抗性: | 氨芐和卡那 |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: | 電轉(zhuǎn) |
應(yīng)用: | 酵母蛋白表達,真核細胞蛋白表達 |
■ 使用方法
建議超凈臺內(nèi)劃線涂板,得到單克隆后再進行其他實驗操作,避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會變粉,是正?,F(xiàn)象,可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降,不建議直接長期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存,反復凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實驗室研究,不能用于動物,人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。