■ 產(chǎn)品介紹
EGY48菌株是Clontech公司開發(fā)的LexA 系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株,MATa型,可直接轉化質粒進行蛋白互作驗證或篩庫試驗;Transformation marker為: his3, trp1, ura3,報告基因為:LEU2;報告基因UAS(上游激活序列)來源于LexA op(x6),只有當Bait和Prey互作時才能啟動LEU2表達 。EGY48-LexA酵母雙雜系統(tǒng)系統(tǒng)需要三種質粒配套使用:pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。質粒pLexA的篩選標志為HIS3,用于表達DNA-BD(來自原核的202個氨基酸殘基組成的LexA蛋白)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白;質粒pB42AD的篩選標志為TRP1,用于表達AD(來自皰疹病毒的88個氨基酸殘基組成的B42AD蛋白)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白;報告質粒p8op-LacZ的篩選標志為URA3,報告基因為LacZ,報告基因UAS來源于LexA op(x8) ,只有當Bait和Prey互作時才能啟動LacZ表達。EGY48菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),然后用30%甘油保藏菌種。 |
基因型: | MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD/YPDA |
菌株類別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28℃,有氧,YPD/YPDA |
質粒轉化: | 化轉/電轉 |
保存方式: | 30%甘油,-80℃ |
基本應用: | 用于酵母雙雜交 |
■ 使用方法
收到菌液及時四區(qū)劃線活化,挑取單克隆在YPD中培養(yǎng)到生長對數(shù)中后期加入終濃度30%無菌甘油保種,分裝置于-80℃保存,避免反復化凍。建議超凈臺內劃線涂板,避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會變粉,是正?,F(xiàn)象,可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降,不建議直接長期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存,反復凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實驗室研究,不能用于動物,人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。