■ 基本信息
別名: | pUC-19 |
啟動子: | Lac/lac promoter |
復制子: | pUC |
質粒分類: | 大腸桿菌載體；克隆質粒 |
質粒大小: | 2686bp |
質粒標簽: | LacZ |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
5'測序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
3'測序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
備注: | 藍白斑篩選 |
■ 質粒屬性
質粒宿主: | 大腸桿菌 |
質粒用途: | 基因模板 |
片段類型: | cDNA |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: | |
熒光標記: |
|
■ 質粒簡介
pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ，是最常用的質粒載體，其結構組成緊湊，幾乎不含多余的 DNA片段，GenBank注冊號為 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而來，其中 lacZ (MSC)來自 M13mp18/19 。這兩個質粒的結構幾乎是完全一樣的，只是多克隆位點的排列方向相反。這些質粒缺乏控制拷貝數(shù)的 rop 基因，因此其拷貝數(shù)達 500-700 。 pUC 系列載體含有一段 lacZ 蛋白氨基末端的部分編碼序列，在特定的受體細胞中可表現(xiàn) α-互補作用。因此在多克隆位點中插入了外源片段后，可通過 α-互補作用形成的藍色和白色菌落篩選重組 質粒。pUC18、pUC19載體適合于DNA片段的克隆、進行DNA測序、對外源基因進行表達等。由于在lacZ領域中含有多克隆位點，因此在以lacZ缺欠細胞作為宿主 (如：JM109等) 進行轉化后，在含有IPTG、X-Gal 的平板培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)時，可以很容易地通過藍白篩選，判斷載體中有無DNA片段的插入。同時還可以通過載體上的lac promoter表達外源基因，對插入載體中的DNA片段進行測序等。進行DNA測序時，可以方便地使用M13系列的通用引物。
質粒只保證關鍵序列正確，不保證表達效果。
■ 質粒圖譜
■ 質粒序列
質粒序列可參考（具體以測序為準）下載：
ZK102 puc19.txt
