■ 基本信息
別名: | pBR-322 |
復制子: | pBR322 |
質(zhì)粒分類: | 大腸系列質(zhì)粒;大腸克隆質(zhì)粒;基因克隆質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 4361bp |
原核抗性: | Amp,Tet |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
5'測序引物: | PBR322.F(AAGTGCCACCTGACGTCTAA) |
3'測序引物: | PBR322.R (GCCTGCCACCATACCCAC ) |
備注: | 應用很廣的基因克隆質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 基因模板 |
片段類型: | cDNA
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp,Tet |
真核抗性: |
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熒光標記: |
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■ 質(zhì)粒簡介
pBR322質(zhì)粒相對分子質(zhì)量較小,它帶有一個復制起始位點,保證了該質(zhì)粒只在大腸桿菌的細胞中行使復制的功能。具有兩種抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因,可供轉(zhuǎn)化子的選擇標記。具有較高的拷貝數(shù),經(jīng)過氯霉素擴增以后,每個細胞中可累積1000-3000份拷貝,該特性為重組體DNA的制備提供了極大的方便。同時,由于其為人工構(gòu)建質(zhì)粒,雖然帶有抗藥性基因,但已不能在自然界的宿主細胞間轉(zhuǎn)移,同時應用安全菌株,亦不會引起抗生素抗性基因傳播。
pBR322是一個人工構(gòu)建的重要質(zhì)粒,有萬能質(zhì)粒之稱。它是由pSF2124、pMB1及pSC101三個親本質(zhì)粒經(jīng)復雜的重組過程構(gòu)建而成的。質(zhì)粒載體pBR322是研究得最多,使用最早且應用最廣泛的大腸桿菌質(zhì)粒載體之一。符號質(zhì)粒載體pBR322中的“p代表質(zhì)粒;“BR”代表兩位兩位研究者Bolivar和Rogigerus姓氏的字首,“322”是實驗編號。
質(zhì)粒載體pBR322的大小為4361bp,相對分子質(zhì)量較小的是它第一個優(yōu)點。優(yōu)點之二是它帶有一個復制起始位點,保證了該質(zhì)粒只在大腸桿菌的細胞中行使復制的功能。具有兩種抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因,可供轉(zhuǎn)化子的選擇標記是它的第三個優(yōu)點。質(zhì)粒只保證關鍵序列正確,不保證表達效果。
■ 質(zhì)粒圖譜

■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列可參考(具體以測序為準)下載:
ZK116pBR322大腸克隆質(zhì)粒.txt