■ 基本信息
啟動子: | pR/pL |
復制子: | pUC |
質粒分類: | 大腸桿菌載體;蛋白表達質粒 |
質粒大小: | 3666bp |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5α |
培養(yǎng)條件: | 30℃ |
表達宿主: | 大腸桿菌 |
誘導方式: | 42度 |
5'測序引物: | pBV220-F: 5'-AAGAAGGGCAGCATTCAAAG-3 ' |
3'測序引物: | pBV220-R: 5'-CTGCGTTCTGATTTAATCTG-3 ' |
備注: | 溫控表達質粒 |
■ 質粒屬性
質粒宿主: | 大腸桿菌 |
質粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: | ORF |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
|
熒光標記: |
|
■ 質粒簡介
pBV220質粒的SD sequence(用于結合原核生物核糖體的序列)后緊跟多克隆酶切位點,便于插入帶起始ATG的外源基因,可表達非融合蛋白。
載體含有強的轉錄終止子可 防止出現(xiàn)"通讀"現(xiàn)象,有利于質粒-宿主系統(tǒng)的穩(wěn)定。
載體pBV220為3.7Kb,有利于增加其拷貝數(shù)及容量。pBV220含有PL啟動子和編碼對該啟動子具有抑制作用而又對溫度敏感的cI蛋白基因cIts857調控基因cI,因此可用溫度對插入其中的外源基因的轉錄進行調控。
溫控型原核表達載體,高拷貝數(shù),大容量,強啟動子,強轉錄終止子,可在任何受體菌中誘導表達。
pBV220載體是λPL/PR-cI857溫度敏感系統(tǒng)表達載體,能夠在42 ℃表達非融合的目的蛋白。
在利用pBV220載體進行質粒構建的時候,需要加入ATG起始密碼子。
PBV220質粒屬于溫度誘導表達型,培養(yǎng)溫度為30 ℃,誘導溫度為42 ℃。
Ampr, 氨芐抗性基因;
ori, 質粒復制起點;
cIts857, lambda 噬菌體表達抑制基因,但是在熱誘導條件下能夠表達目的基因;
PRPL, 來自于lambda 噬菌體的串聯(lián)的PR和PL啟動子,保證基因的高水平表達;
SD, Shine-Dalgarno序列;
rrnB, 核糖體rrnB基因,是基因轉錄終止信號;
pBV220載體是我國預防醫(yī)學科學院病毒研究所自行構建的大腸桿菌溫控表達載體,目前仍在廣泛使用。
質粒只保證關鍵序列正確,不保證表達效果。
■ 質粒圖譜

■ 質粒序列
質粒序列請下載:
ZK326pBV220大腸表達質粒.txt