■ 基本信息
啟動子: | GAP |
復制子: | pUC |
終止子: | AOX1 TT |
質粒分類: | 酵母系列，畢赤酵母表達載體 |
質粒大小: | 2882bp |
質粒標簽: | C-Myc, C-His |
原核抗性: | Zeo |
真核抗性: | Zeo |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達宿主: | 酵母細胞 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，YPD |
誘導方式: | 無須誘導 |
5'測序引物:
| pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA
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3'測序引物: | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT
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■ 質粒屬性
質粒宿主: | 酵母菌 |
質粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: |
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片段物種: |
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原核抗性: | Zeo |
真核抗性: | Zeo
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熒光標記: |
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■ 質粒簡介
甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）的酶在許多生物細胞中包括畢赤酵母，穩(wěn)定高水平表達。最近，GAPDH蛋白編碼基因啟動子（GAP）被深入研究，并在畢赤酵母中能夠高水表達重組蛋白，這取決于使用的碳源（Waterham等人，，1997）。GAP啟動子（PGAP）的重組蛋白表達水平略高于AOX1啟動子。
pGAPZ A，B，和C載體（2.9 KB）和pGAPZα，B，和C（3.1 KB）載體使用GAP啟動子在畢赤酵母中穩(wěn)定表達重組蛋白。重組蛋白表達為為帶有C-末端myc抗原表位和C端His標簽的融合蛋白。此外，pGAPZα表達的融合蛋白在N-端帶有釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信號肽。這兩個系列的載體都提供三個不同讀碼框的載體，以方便克隆的帶有C-端標簽和/或N-末端分泌信號肽的載體中。這些載體是基于顯性選擇標記，Zeocin（博萊霉素）的篩選標記可以同時使用于畢赤酵母和大腸桿菌。
■ 質粒圖譜
■ 質粒序列
質粒序列請下載：
ZK929pGAPZB畢赤酵母質粒.txt
