■ 基本信息
別名: | pHT-43 |
啟動子: | Pgrac |
復(fù)制子: | pUC |
質(zhì)粒分類: | 廣宿主系列，枯草桿菌載體 |
質(zhì)粒大小: | 8057bp |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: | Chl |
克隆菌株: | Stbl3 |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達(dá)宿主: | 枯草芽孢桿菌 |
誘導(dǎo)方式: | IPTG誘導(dǎo) |
5'測序引物: | 根據(jù)序列設(shè)計(jì)引物 |
3'測序引物: | 根據(jù)序列設(shè)計(jì)引物 |
備注: | 枯草桿菌IPTG誘導(dǎo)分泌表達(dá)空載體 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 枯草桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類型: | ORF
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡介
所有在枯草芽孢桿菌的groESL操縱子之前使強(qiáng)啟動子與lac操縱子融合的載體都可通過加入IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)。盡管當(dāng)未添加誘導(dǎo)物時(shí)表達(dá)組件的背景表達(dá)水平很低，還是成功從約1300種誘導(dǎo)因子中篩選出一種來使用bgaB報(bào)道基因（Phan等，2005）。當(dāng)分別將htpG和pbpE基因融合到groE啟動子時(shí)，加入IPTG后，表達(dá)的重組蛋白可能分別占細(xì)胞總蛋白的10%和13%（Phan等，2005）。熱纖梭菌的amyQα-淀粉酶和纖維素酶A、B的高水平表達(dá)實(shí)驗(yàn)證實(shí)。該載體還插入了一個(gè)高效SD序列以及一個(gè)多克隆位點(diǎn)（BamH I, Xba I, Aat II, Sma I）。編碼α-淀粉酶的amyQ基因的信號肽編碼區(qū)域與pHT01的SD序列融合，構(gòu)成了pHT43，以此獲得分泌的重組蛋白。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請下載：
ZK1016pHT43枯草分泌質(zhì)粒.txt
質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確，不保證表達(dá)效果。
