■ 基本信息
啟動(dòng)子: | CMV |
復(fù)制子: | pUC |
終止子: | SV40 poly(A) signal |
質(zhì)粒分類: | 基因文庫質(zhì)粒;大鼠基因質(zhì)粒;大鼠真核質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 7079bp |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | C-EGFP |
原核抗性: | Kan |
真核抗性: | G418 |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達(dá)宿主: | 293T等哺乳細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件: | 37℃ ,5%CO2 |
誘導(dǎo)方式: | 無需誘導(dǎo) |
5'測(cè)序引物: | pEGFP-N-5(TGGGAGGTCTATATAAGCAGAG) |
3'測(cè)序引物: | pEGFP-N-3(CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG) |
備注: |
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■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 哺乳細(xì)胞 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類型: | ORF
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片段物種: | 大鼠
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原核抗性: | Kan |
真核抗性: | G418 |
熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡介
pEGFP-Notch1-NICD-r質(zhì)粒在CMV強(qiáng)啟動(dòng)子的作用下表達(dá)EGFP-Notch1-NICD融合蛋白,其中的跨膜大分子Notch1受體主要參與發(fā)育過程中的細(xì)胞命運(yùn)的選擇。其G1743和V1744部位發(fā)生水解釋放產(chǎn)生的活性片段-胞質(zhì)段(Notch1 intracellular cytoplasmic domain,NICD)能被轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)核,激活下激靶基因的表達(dá),Notch1參與細(xì)胞的增殖、分化、程序性死亡、發(fā)育過程中的形態(tài)發(fā)生和器官形成等許多重要過程。我們構(gòu)建的pEGFP-Notch1-NICD-r質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)COS-7L細(xì)胞,可以觀察到綠色熒光蛋白為核定位,提示克隆的NICD基因符合進(jìn)一步研究NICD在分裂后神經(jīng)元的功能。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請(qǐng)下載:
ZK1534pEGFP-Notch1-NICD-r大鼠基因質(zhì)粒.txt